已經包被的抗體,抑制包被抗體與酶標物結合。加入底物后,產生的顏色強弱與樣品中**的濃度成反比。
試劑盒組成部分和儲存
本試劑盒應當在 2-8℃的溫度下儲存,有效期為一年。如果超過 2 周不使用試劑盒,請將標準品和酶標物放置-20℃或者冰凍保存。
1) 標準品中含有 MQCA,請小心使用。 2) 不要使用過期的試劑盒。 3) 不同批次的試劑盒不要混用,抗體和微孔板具有盒與批次的特異性。確??贵w、酶結合物及酶結合物稀釋液正確配制。 4) 盡量保持室溫(22.5±2.5)°C,避免在通風口操作防止溫度過低,過熱和/或者蒸發。同樣的,不要在陽光直射下實驗,防止過熱及蒸發。在孵育期間,如果工作臺溫度過低,應該鋪墊若干 紙巾或者其他物料。 5) 水質量很重要,確保使用蒸餾或者去離子水。 6) 加入樣品或者試劑到空的微孔板時,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接觸。 7) 孵育時間的計算越規范越好,保持添加標準品的一致性,先添加標準品后添加樣品。 8) 從低濃度到高濃度地添加標準品,降低影響標準品曲線質量的風險。 9) 將微孔板置于放有干燥劑的密封袋中,冷藏保存。 檢測: 以下為計算份量的表格,用戶可根據自己的需要來確定需要配置多少試劑。 試劑 每個反應需要的體積 4 24 次反應的體積 酶標物 50 uL 1.2mL 工作洗液 2 mL 48mL 終止液 100 uL 2.4 mL 底物 100 uL 2.4 mL (1) 加入 100uL 的標準品或樣品于所設定的孔中; (2) 在每孔中加入 50uL 酶標物, 輕輕搖動微孔板混勻 1 分鐘; (3) 室溫(22.5±2.5)°C 避光孵育 30 分鐘; (4) 洗板 3 次,每次加入 250uL 1×洗液,*后一次盡量甩干并在吸水紙上吸干; (5) 加入 100uL 的 TMB 底物,室溫(22.5±2.5)°C 避光孵育 10-15 分鐘; (6) 加入 100uL 的終止液終止反應,在 450nm 下讀 OD 值(讀數前使用無絨布擦拭微孔底部水分和指模)。